[本篇论文由上帝论文网为您收集整理，上帝论文网http://paper.5var.com将为您整理更多优秀的免费论文，谢谢您的支持]         作者：张利萍， 王莲芸，王怀云【摘要】  目的 探讨季节性联合呼吸道过敏性患者的发病原因。方法  对52例既患过敏性鼻炎，又患支气管哮喘患者采用荧光酶联免疫法(FEIA)定量检测血清总IgE和特异性IgE；用酶联免疫吸附试验（ELISA）定量分析血清可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）和E-选择素（sE-Selectin）。结果  患者组的血清总IgE显著高于正常对照组；在52例季节性联合呼吸道过敏患者中可检测到过敏原的特异性IgE的为蒿花粉43例（82.7%）、屋尘螨26例（50%）、屋尘15例（28.8%）、草花粉12例（23%）、粉尘螨3例（5.8%）；试验组的sICAM-1算术均数（378.61 ng/ml）较对照组（213.42 ng/ml）明显增高（P<0.0001）；试验组的sE-Selectin（62.61 ng/ml）高于对照组（35.72 ng/ml），P<0.0001。结论  引起这52例季节性呼吸道过敏性炎症的主要因素为蒿花粉，其次是屋尘螨，季节性联合呼吸道过敏性患者高表达的细胞间粘附分子-1和E-选择素。        【关键词】  联合呼吸道过敏；  过敏性鼻炎；  支气管哮喘；  血清特异性IgE；  粘附分子               【Abstract】  Objective  To study pathogenesis of united seasonal airways hyperreactivity.Methods  We investigated the relationship between specific IgE and soluble cellular adhesion molecular in 52 patients and 20 health persons. The sera total IgE(tIgE) and specific IgE (sIgE) were measured by a fluoroenzymeimmunoassay (Uni-CAP Pharmacia， Uppsala， Sweden). The sera soluble intercellular adhesion molecule-1 (sICAM-1) and E-selectin were performed with ELISA.Results   There were 43 patients (82.7%) suffered from artemisia pollen， 26 (50%) from house dust mite， 15(28.8%) from house dust， 12(23%) from humulus pollen and 3(5.8%) from dermatophagoides farinae in 52 patients. The values of sICAM-1，sE-selectin and tIgE in combined allergic rhinitis and asthma patients were significantly higher than those of control（P<0.0001）.Conclusion  The results demonstrate that the expression of sera sICAM-1 and sE-selectin in united airways hyperreactivity are higher than that of health persons. The allergens of induced united seasonal inflammation mainly are artemisia pollen， secondly house dust mite.        【Key words】  united airway hyperreactivity；allergic rhinitis；bronchial asthma； IgE；adhesion molecular        季节性呼吸系统的过敏性疾病包括上呼吸道的季节性变应性鼻炎和下呼吸道的支气管哮喘。通常情况下对变应性鼻炎和支气管哮喘分别进行研究，但是，在临床上经常会遇到同一个病人既有发作性打喷嚏、流大量的清水样鼻涕，又有支气管哮喘发作（联合呼吸道过敏症）。那么，这类患者的主要发病原因是什么？其血清中的总IgE、特异性IgE、血清可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）和E-选择素（sE-Selectin）有何变化？对此本文进行了探讨。　        1  资料与方法        52例联合呼吸道变态反应患者（男25例、女27例），在每年7、8、9月主要表现为连续打5个喷嚏、流清水样鼻涕，鼻塞、咽喉痒、阵发性咳嗽和呼吸困难、咯大量白色泡沫状痰，夜间不能平卧，在发作期体格检查可见下鼻甲黏膜呈苍白色或淡粉白色水肿状，咽部充血，两肺可闻及哮鸣音，病程最短的2年，最长的20年。另设正常对照组20例（男10例，女10例），既往无特殊病情记载，体检未发现心肺、肝、脾、泌尿和血液等疾病。患者组（试验组）和对照组的年龄均在15～48岁之间。        对试验组和对照组均空腹采血2ml，常温下静置2h，取血清分装在3支ependorf管中，-70℃存放，备用。        1.1  血清总IgE（tIgE）和特异性IgE（sIgE）定量测定（荧光酶联免疫法）  取患者血清50μl，加入到被特异性抗原包被过的经预洗的CAP中，37℃孵育后，洗去未结合的血清，加入β-半乳糖苷酶标记的抗IgE抗体，继续孵育后再冲洗，再加入底物4-甲基伞桂β-半乳糖苷，以终止液终止反应，并测定其吸光值。从标准曲线上读出相应的特异性IgE的含量（WHO 75/502标准：0.35～100 ku/L）。上述过程均在Uni CAP系统-100型(Pharmacia)自动完成，所有试剂均由Pharmacia公司提供。试验组检测血清屋尘螨（d1）、粉尘螨（d2）、屋尘（h1）、蒿花粉（w6）、草花粉（w22）的特异性IgE。试验组和对照组均测血清总IgE。        1.2  血清可溶性粘附分子分析  sICAM-1和E-选择素采用酶联免疫吸附试验(ELISA)。        1.2.1  实验原理  首先将抗sICAM-1和抗sE-Selectin的抗体分别包被在不同的免疫板微孔的壁上，再将稀释20倍的血清分别加入不同的已包被的免疫板的微孔内，形成sICAM-1与抗ICAM-1的结合物、sE-Selectin与抗E-Selectin的结合物；然后，这两种结合物分别与辣根过氧化酶标记的抗抗体（anti-ICAM-1-HRP、anti-E-Selectin-HRP 酶标二抗）结合，形成sICAM-1＋anti-sICAM-1＋anti-ICAM-1-HRP、sE-Selectin＋anti-E-Selectin＋anti-E-Selectin-HRP复合物。最后加入底物（四甲基联苯胺），与辣根过氧化酶发生反应，产生有色物质，在波长450～620nm读光密度值（OD值）。根据标准品描记出标准曲线，计算其每一样品的sICAM-1、sE-Selectin的含量。        1.2.2  实验步骤  (1)按1：20浓度稀释待测血清；(2)在免疫板的微孔中分别加入100μlanti-ICAM-1-HRP、anti-E-Selectin-HRP；(3)再分别加入100μl标准品、样品稀释液、质控参数液；(4)盖板后室温下孵育1.5h；(5)用缓冲液洗板6遍；(6)分别加底物100μl盖板后，室温下再孵化30min；(7)加100μl终止液；(8)在酶标仪上选定波长为450nm测吸光值，620nm作为校正值；(9)制作标准曲线；(10)根据标准曲线将每一测试样品的OD值换算出sICAM-1和sE-Selectin的含量（ng/ml）。        其试剂从英国R＆D Systems 购买，酶标仪为Bio-Rad（美国）产品。        1.3  统计学处理  采用SPSS12.0 软件对两组资料进行正态性检验、方差齐性检验和t检验。        2  结果        2.1  特异性IgE（sIgE）定量测定结果  在52例季节性联合呼吸道过敏患者中可检测到过敏原的特异性IgE的为蒿花粉43例（82.7%）、屋尘螨26例（50%）、屋尘15例（28.8%）、草花粉12例（23%）、粉尘螨3例（5.8%），见表1。表1  52例联合呼吸道过敏患者血清特异性IgE定量（ku/L）分析结果    2.2  血清总IgE测定结果  试验组与对照组的血清tIgE（ku/L）的含量呈正偏态分布。试验组的血清tIgE几何均数（2.61）显著高于对照组（1.39），P<0.0001。        2.3  血清可溶性粘附分子定量分析结果  试验组的血清可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）和E-选择素（sE-Selectin）的含量均呈正态分布，方差齐性检验示方差齐；双侧t检验提示两组间差异有非常显著性。试验组的sICAM-1算术均数（378.61 ng/ml）较对照组（213.42 ng/ml）明显增高（P<0.0001）；试验组的sE-Selectin（62.61 ng/ml）高于对照组（35.72 ng/ml），P<0.0001，见表2。 表2  血清可溶性粘附分子（ng/ml）比较注：*P<0.0001        3  讨论        变应性鼻炎和支气管哮喘均是由IgE介导Ⅰ型变态反应，本研究采用荧光酶联免疫法对52例既有季节性过敏性鼻炎，又有季节性哮喘发作的患者进行血清总IgE定量分析发现，患者组高于对照组（P<0.0001）。进一步对这52例夏秋季联合呼吸道过敏患者进行了5种吸入性变应原的血清特异性IgE定量分析发现，阳性例数依次为蒿花粉43例（82.7%）、屋尘螨26例（50%）、屋尘15例（28.8%）、草花粉12例（23%）、粉尘螨3例（5.8%）。由此可见，引起

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