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10%的高氯酸为蛋白沉淀剂)； C：给药后血浆样品； D：空白血浆+头孢氨苄+甲氧苄啶(1倍体积的乙腈 为蛋白沉淀剂)； E：空白血浆+头孢氨苄+甲氧苄啶+诺氟沙星(0.5倍体积10%的高氯酸为蛋白沉淀剂) 图1 样品的HPLC色谱图 图2 单剂量口服头孢氨苄(A)/甲氧苄啶(B)兔体内平均血药浓度－时间曲线图 个样品运行时间长达15min。在检测波长240nm下，检测器对诺氟沙星响应低，峰形展宽严重。作者采用pH3.0的0.05mol/L的磷酸盐缓冲液∶乙腈∶甲醇(76∶16∶8)为流动相，基线平衡快，但内标峰形仍未见改善(见图1E)，故采用外标法。 作者还考察了流动相的pH值和组成对分离度及峰形的影响，发现pH值对分离度影响较大，偏酸性条件下，pH值升高，越易于分离，但两者拖尾越来越严重。pH3.0时能达到基线分离，拖尾最小。流动相中甲醇的比例升高，甲氧苄啶保留时间的变化大于头孢氨苄，说明甲氧苄啶比头孢氨苄对甲醇更加敏感。还考察了甲酸甲酸钠、乙酸乙酸钠、不同浓度的磷酸盐缓冲液对拖尾的影响，发现使用0.05mol/L的磷酸盐缓冲液峰拖尾最小，最终确定了本实验的色谱条件(色谱图见图1A、图1B和图1C)。 同时还考察了不同蛋白沉淀剂对峰形的影响。发现使用1倍体积的乙腈［7］、3倍体积的甲醇，峰形展宽严重，柱效不高(图1D)；0.5倍体积10%的三氯乙酸溶剂峰很大，干扰主峰；而使用0.5倍体积10%的高氯酸，蛋白沉淀效果好，不仅可以防止峰形展宽，提高了柱效，而且可以降低对样品的稀释作用。 【参考文献】
［1］ 刘健，钟巍，康子胜，等. 甲氧苄氨嘧啶与头孢氨苄体外联合抗菌作用［J］. 中国临床药理学杂志，2003，19(1)：17～22.
［2］ 罗楠，刘放南，万秀珍，等. 反相高效液相色谱法测定大鼠头孢氨苄血药浓度［J］. 医学研究生学报，2006，19(9)：783～785.
［3］ Samanidou V F, Hapeshi E A, Papadoyannis I N. Rapid and sensitive high performance liquid chromatographic determination of four cephalosporin antibiotics in pharmaceuticals and body fluids ［J］. J Chromatogr B,2003,788(1):147～158.
［4］ Hruska M W, Frye R F. Determination of trimethoprim in lowvolume human plasma by liquid chromatography ［J］. J Chromatogr B,2004,807(2):301～305.
［5］ Croubels S, Baere S D, Backer P D. Comparison of a liquid chromatographic method with ultraviolet and iontrap tandem mass spectrometric detection for the simultaneous determination of sulfadiazine and trimethoprim in plasma from dogs ［J］. J Chromatogr B, Biomed Sci Appl,2003,788(1):167～178.
［6］ 杜斌，张振中，张秋荣，等. 高效毛细管电泳法同时测定血浆中头孢羟氨苄和甲氧苄啶的含量［J］. 中国抗生素杂志，2005，30(6)：344～346.
［7］ Qi M L, Wang P, Sun P, et al. Liquid chromatographic method for the simultaneous determination of cefalexin and trimethoprim in dog plasma and application to the pharmacokinetic studies of a coformulated preparation ［J］. J Chromatogr B,2006,832(2):307～312. 上一页 [1] [2]
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