095±5，灌注组的蛋白点计数为1569±10。在分子量30-70ku范围内，灌注组的蛋白点计数显著高于对照组(P<0.01)，在其他分子量范围内二者蛋白点计数无显著性差异(图2)。图2  不同分子量的肺组织蛋白分布（略）。在pH值5-8和9-10范围内，灌注组的蛋白点计数显著高于对照组(P<0.01)，在其他pH值范围内二者蛋白点计数无显著性差异(图3)。图3  不同等电点的肺组织蛋白分布（略）

　　3  讨    论

　　肺栓塞的动物模型分为两类：一类是药物引起的肺部弥漫性微血栓；另一类是各种栓子引起的肺部大血管堵塞。我们采用的是第二类肺栓塞动物模型，因为这种模型更接近临床实际情况。实验证明，采用颈静脉插管，生理盐水灌注的方法，可以有效地去除肺组织内的血液成分，使肺组织蛋白能够更好地在2D胶上展示。首先，对照组2D胶上出现的高丰度血液蛋白成分，如：白蛋白、转铁蛋白及红细胞的血红蛋白α链和β链等，在灌注组2D胶上显著减少，相应的增加了肺组织中低丰度蛋白的上样量。其次，灌注组2D胶上的肺组织蛋白成分相应增加，表现为蛋白点计数的提高。对照组的蛋白点计数为1095±5，灌注组的蛋白点计数为1569±10。在分子量30-70ku范围内，灌注组的蛋白点计数显著高于对照组(P<0.01)，在其他分子量范围内二者蛋白点计数无显著性差异。在pH值5-8和9-10范围内，灌注组的蛋白点计数显著高于对照组(P<0.01)，在其他pH范围内二者蛋白点计数无显著性差异。

　　需要注意的是在对肺组织进行生理盐水灌注时，需要严格控制生理盐水的量和灌注时间。生理盐水量不足，使血液成分得不到有效置换；灌注时间过长，会使肺组织蛋白分解。本实验每只大鼠的生理盐水用量为500mL，采用加压输注的方法，使灌注时间控制在5min内，既可有效去除血液成分，也可防止蛋白分解。

    参考文献：

　　[1]Sam H. Disease proteomics . Nature, 2003, 422(2): 226232.

　　[2]Eric P, Philippe IHB, Zhu H, et al. Protein analysis on a proteomic scale . Nature, 2003, 422(2):208215.

　　[3]de Hoog CL, Mann M. Proteomics . Annu Rev Genomics Hum Genet, 2004, 5(2):267293.

　　[4]Andrej S, Robert G, Thomas E, et al. From words to literature in structural proteomics . Nature, 2003, 422(2):216225. 

　　[5]李圣青,张艰,戚好文,等.小鼠肺栓塞模型的诱导及比较 . 第四军医大学学报, 2004, 24(9):813814.

　　[6]陈永利, 张敬霞, 袁志明, 等. 实验性急性血栓性肺栓塞动物模型的建立 . 天津医科大学学报, 2003,9(1):46

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