则即为雌性胚胎。由于PCR极为灵敏,所以只要从胚胎中取出几个细胞就可以进行性别鉴定,这对性别鉴定后胚胎移植的妊娠率没有影响。龚荣慈,等实验表明,只要8pg的DNA即可检出ZFY、ZFX序列而判定胚胎的雌雄[12]。在国内,曾溢滔,等(1991)就通过对牛SRY基因的直接测序,设计引物用PCR扩增SRY基因来检测奶牛胚胎的性别[9],杨建明,等[10](1995)、欧阳红尘[11](1995)等则通过扩增牛Y染色体特异DNA序列来鉴定牛早期胚胎性别,而龚荣慈,等设计了特异于牛ZFY基因的引物对奶牛基因组DNA进行NestPCR来进行性别鉴定。黄淑帧,等通过扩增SRY基因对转基因试管牛和试管羊胚胎进行了性别鉴定,得到的转基因牛和转基因羊的性别和鉴定结果完全一致[13]用PCR鉴定家畜胚胎的性别其主要程序为:①胚胎的获取:冷冻胚胎、刚从供体牛回收的鲜胚或体外受精培养的胚胎都可以用来鉴定性别;②引物的设计:根据Y染色体上的性别决定基因或特异性片段设计引物,同时设计一对公母共有基因引物作为内对照,避免假阳性的发生;③用显微操作或徒手从胚胎中取出几个细胞热处理后进行PCR扩增;④电泳检测。能同时扩增出Y-染色体上相应片段和公母共有基因片段的胚胎即为雄性胚胎,而只能扩增出共有基因片段的胚胎即为雌性胚胎。 PCR鉴定胚胎性别的研究成功,使胚胎的性别鉴定进入了一个崭新的发展阶段,但是只有进一步研究简易快速的胚胎切割取样技术、胚胎性别鉴定的PCR试剂盒以及取样胚胎的冷冻保存技术,才能达到推广应用阶段,相信在不久的将来,所有这些问题都能得到解决。 上一页 [1] [2]
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