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系统中属中等极性，检测到的条带最多，总条带有3039个；I系统(氯仿∶甲醇=9∶1)有2708个，III系统(正丁醇∶乙酸∶水=4∶1∶5)只有2616个。不同的检测条件检测到的结果 2.4 HPLC检测结果 选取部分菌株样品进行HPLC检测，结果显示，不同菌株产生的次生物质存在明显差异，相同菌株在不同培养基中也存在一定的差异。在254nm波长的检测条件下，用1号培养基发酵后产生的产物比其它培养基发酵产生的产物多，结果与TLC检测结果相对应。Fig.2为具有高抗菌活性的植物内生放线菌菌株YIM 48790(Dactylosporangium属的潜在新种)和YIM 56167采用1号培养基发酵后的次生代谢产物。图中明显看出，两株放线菌通过1号培养基发酵后产生了大量次生代谢产物，代谢产物的组成也大不一样。 3 讨论 89株植物内生菌、5株放线菌潜在新种采用4种培养基进行发酵，三种检测方法检测，所获得的结果表明，不同培养基产生的代谢产物各不相同。52%(49株)的菌株用1号培养基发酵，产生的代谢产物条带总数最多；44%的菌株用4号培养基发酵条带最多。但每一株菌产生最多产物的培养基各不相同。同一个菌株在不同培养基发酵的产物种类也不一样，1号培养基成分最单一，便于化合物的提取、纯化，且成本低廉；4号培养基成分比较复杂，不利于以后化合物的分离纯化。所以1号培养基是一种比较理想的发酵培养基，可 Fig.2 HPLC chromatography of 2 actinomycete strains at 254nm以在筛选时用于大量菌株的发酵。三种检测条件中，茴香醛检测法获得的总条带最多，也可供选用。这些结果为设计适合的发酵培养条件、检测方法以及活性产物的分离、制备奠定了基础。 在微生物生物活性物质研究中，无论TLC检测还是HPLC检测，和其它现代仪器的检测都是可行的途径，但特别要注意实验条件的标准化，确保数据的准确性，同时要建立相应的数据库，使数据储存、检索、查寻、分析程序化。 发现新的先导化合物是开发天然药物的重要关键之一［11］，高活性菌株、新菌种提供了发现新产物的可能性。要实现这种可能性，发酵是重要环节。过去对植物内生菌、极端环境微生物、海洋微生物培养条件的研究不多，但这些微生物是很有开发潜力的资源，应该重视这方面的研究，为发现新先导化合物提供技术支持 【参考文献】
［1］ Bérdy J. Bioactive microbial metabolites, a personal review ［J］. J Antibiot,2005,58(1):1～26.
［2］ 徐丽华，李文均，刘志恒，等. 放线菌系统学［M］. 北京：科学出版社，2007.
［3］ 姜怡，徐平，娄恺，等. 放线菌药物资源开发面临的问题与对策［J］. 微生物学通报，2008，35(2)：272～274.
［4］ Hughes J B, Hellmann J J, Ricketts H, et al. Counting the uncountable: Statistical approaches to estimating microbial diversity ［J］. Appl Environ Microbiol,2001,67(10):4399～4406.
［5］ Zengler K, Toledo G, Rappé M, et al. Cultivating the uncultured ［J］. PNAS,2002,99(24):15681～15686.
［6］ Joseph S J, Hugenholtz P, Sangwan P, et al. Laboratory cultivation of widespread and previously uncultured soil bacteria ［J］. Appl Environ Microbiol,2003,69(12):7210～7215.
［7］ 姜怡，杨颖，陈华红，等. 植物内生菌资源［J］. 微生物学通报，2005，32：146～147.
［8］ 黄秀梨. 微生物学实验指导［M］. 北京：高等教育出版社，1999.
［9］ Shirling E B, Gottlieb D. Methods for characterization of Streptomyces species ［J］. Int J Syst Bacteriol,1966,16:313～340.
［10］ Hayakawa M, Nonomura H. Humic acidvitamin agar, a new medium for the selective isolation of soil actinomycetes ［J］. J Ferment Technol,1987,65:501～509.
［11］ 刘志恒. 放线菌微生物药物的重要资源［J］. 微生物学通报，2005，32(6)：143～145. 上一页 [1] [2]
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