究证明该系统是筛选和鉴定相互作用蛋白、或者蛋白配体的敏感而有效的研究技术,而且整个筛选过程是在真核细胞内完成的,两种蛋白相互作用环境接近真核细胞内相互作用的环境,对筛选相互作用较弱的蛋白,这种技术的优势显得更为明显。然而酵母双杂交系统成为生物学家研究蛋白相互作用的标准方法的同时,也存在它固有的缺点,容易出现假阳性克隆,所以在用酵母双杂交系统进行文库筛选之后,通过多种方法进行验证排除假阳性是必不可少的。而笔者采用的是一对一酵母配合法,得到真阳性克隆,显示FXR1P 和 Bcl-2-associated transcription factor 1 (Btf)有相互作用。接下来我们还将利用免疫共沉淀技术对其进行验证,进一步确定相互作用的存在。【参考文献】 1 Cerkerk AJ. Identification of a gene (FMR1) containing a CGG repeat coincident with a breadpoint cluster region exhibiting length variation in fragile X syndrome. Cell,1991,65: 905-914. 2 Zhang Y,O’ connor JP,Siomi MC,et al. The fragile X mental retardation syndrome protein interacts with novel homlogs FXR1 and FXR2. EMBO J,1995,14(21):5358-5366. 3 陈雨亭,B Bardoni,余珉,等.FMRP与TDG 蛋白的相互作用.科学通报,1999,44(18):1981-1986. 4 Bardoni N,Schenck A,Mandel JL. A nomel RNA-bingding nuclear protein that interacts with the fragile X mental retardation (FMR1) protein. Hum Mol Genet,1999,8(13):2557-2566. 5 Bardoni B,Castets M,Huot ME,et al. 82-FIP,a novel FMRP (fragile X mental retardation protein ) interacting protein,shous a cell cycle-dependent intracellular localization. Hum Mol Genet,2003,12(14): 1689-1698. 6 Fields S,Song OK. A novel genetic system to detect protein-protein interactions. Nature,1989,340:245-246. 上一页 [1] [2]
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