B7分子主要存在于活化的B细胞和抗原呈递细胞表面。大多数肿瘤细胞由于没有B7分子，因此肿瘤细胞虽具有肽抗原与MHCⅠ类分子的复合物，但由于不能提供第二信号，所以不能活化TC细胞［7，8］。因此肿瘤细胞与抗原提呈细胞的融合可以提供T细胞活化通路，这就为肿瘤疫苗的研制展示了光明的前景。    人和啮齿类细胞的HGPRT基因位于X染色体上，该基因在两性细胞中都呈半合子状态（单倍性），它的基因产物为次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT），由2～4个蛋白亚单位组成，该酶能促次黄嘌呤和鸟嘌呤与磷酸核糖焦磷酸(PRPP)间的转磷酸核糖基作用而生成一磷酸次黄苷(IMP)，这是细胞合成的补救途径，但此酶特异性不强，也能把嘌呤拟似物6-巯基嘌呤(6-MP)和8-氮杂鸟嘌呤(8-AG)掺入DNA中引起细胞死亡，因此，当HGRPT基因突变时，细胞就表现为对6-MP或8-AG的抗性，在有6-MP或8-AG的条件下，它们能够生存，而野生型细胞即能够摄取6-MP或8-AG而死亡，以上特点是构成HGRPT突变细胞筛选的理论基础［3］。    本实验所筛选的突变细胞系，仍具有典型肿瘤细胞的生物学特性，细胞个体大而丰满，整齐，有个别巨大的细胞，可见有核分裂相，细胞生长良好。细胞核异型性明显，加入HAT后细胞在24h后即出现死亡，72h后细胞全部死亡。细胞周期G1/G2=1.837，为亚三倍体细胞，符合肿瘤细胞的特点。接种C3H小鼠体内14天后全部成瘤，成瘤率为100％。    HGPRT基因缺陷型骨肉瘤细胞由于HGRPT表达缺失，对HAT不敏感，能用HAT筛选出来。因此，在骨肉瘤细胞的免疫治疗研究中可作为一种简便的分离筛选手段。这种筛选方法以用于骨肉瘤细胞的融和，以筛选杂交瘤细胞，导致免疫学特性的变化，将有利于肿瘤细胞的更进一步的研究及研制更为有效的杀灭肿瘤细胞的生物治疗方法。    【参考文献】    1  Guo Y， Wu  M， Chen H，et al.Effective tumor vaccine generated by fusion of hepatoma cells with actilated B cells.Science，1994，263:518.    2  Vanhaesebroeck B， Mared M， Rag FV，et al. Expression of  the  tumor nerosis factor gene  in tumor cells correlates with reduced tumorigenicity and reduced invasiness in vitro.Cancer Res，1991，51：220.    3  司徒镇强，吴军正.细胞培养.西安：世界图书出版公司，1996，181-187.    4  Biagi E， Yvon E， Dotti G，et al.By stander transfer of functional human CD40 ligand from gene-modified fibroblasts to B-chronic lymphocytic leukemia cells.Hum Gene Ther，2003，14(6):545-559.    5  Takahashi S， Yotnda P， Rousseau RF，et al.Transgenic expression of CD40L and interleukin-2 induces an autologous antitumor immune response in patients with non-Hodgkin’s lymphoma.Cancer Gene Ther，2001，8(5):378-387.    6  Cayeux S， Qin Z， Dorken B，et al.Decreased generation of anti-tumor immunity after intrasplenic immunization.Eur J Immunol，2001，31(5):1392-1399.    7  Hinkel A， Tso CL， Gitlitz BJ，et al.Immunomodulatory dendritic cells generated from nonfractionated bulk peripheral blood mononuclear cell cultures induce growth of cytotoxic T cells against renal cell carcinoma.J Immunother，2000，23(1):83-93.     8  Maitre N， Brown JM， Demcheva M， et al.Primary T-cell and activated macrophage response associated with tumor protection using peptide/poly-N-acetyl glucosamine vaccination.Clin Cancer Res，1999，5(5):1173-1182.

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